danny 2008-3-31 10:57
蛋白質CBR染色法原理
原理:
利用(1) coomassie Brilliant R-250分子上的芳香苯環與蛋白質分子上疏水性的區域結合; (2) coomassie Brilliant R-250分子上的亞硫酸基團(-SO32-)與蛋白質分子的正電荷結合,而使蛋白質染出藍色的色帶。
試劑:
CBR染色液:
coomassie Brilliant R-250 0.75 g
methanol 250 ml
acetic acid 50 ml
milli Q water 200 ml
CBR脫色液:
20% methanol & 10% acetic acid in milli Q water
儀器:
乾淨塑膠盒、玻璃片、玻璃紙
步驟:
1. 將電泳後之膠片浸入CBR染劑中20~30 min,
2. 倒出染劑,以自來水清洗後以CBR脫色液退色至蛋白質色帶清楚呈現為止。